DNA-Mengenabschätzung < Biologie < Naturwiss. < Vorhilfe
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(Frage) beantwortet  | | Datum: | 23:13 Mo 14.11.2011 | | Autor: | howtoadd |
Hallo liebe biologen,
ich frage mich heute den ganzen tag lang, wie ich anhand eines gelbilds meine DNA-Mengen abschätzen kann anhand eines Agarosegels?!
Ich habe heute bemerkt,... es gibt verschiedene varianten, zumindestens hat jeder auf seine eigene art und weise abgeschätzt.
Und zwar wurde benutzt>
2 [mm] \mu [/mm] l Aliquots, Plasmid DNA
und als Konzentrationsstandard 100ng Plasmid DNA
für die anschliessende PCR Reaktion brauchten wir>
750 ng Plasmid DNA
8 [mm] \mu [/mm] l Reaktionsmix...
Ich weiss, ohne Gelbild ist das bestimmt nicht einfach zu erklären, aber vielleicht kann mir wer das prinzip erklären. Ich weiss, dass je schwächer meine Bande ist, desto weniger Plasmid-DNA wurde isoliert, und umso mehr sollte ich für meine PCR Reaktion dann einsetzen.
Mal angenommen, mein Konzentrationsstandard und eine Probe meiner Plasmid DNA sind auf der selben Ebene, und ich habe eine dreifach so dicke Bande, wie mein Konzentrationsstandard. Wie schätze ich denn rechnerisch nun meine Menge ab ?
gruss
howtoadd
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(Antwort) fertig  | | Datum: | 13:05 Di 15.11.2011 | | Autor: | babuji |
Hi howtoadd,
les dir das mal durch :
http://www.carlroth.com/website/de-ch/pdf/DNAMengenabschaetzung.pdf
gruss,
babuji :)
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